====== Рекомендации ЦКП ====== \\ {{sequest:foruser:column-filled.jpg?nolink&100 |}} Для получения наилучших результатов при секвенировании ДНК необходима качественная очистка реакционной смеси от невключившихся флюоресцентно меченных BigDye-ddNTP. Как правило, применяются два основных метода в разных вариантах: спиртовое осаждение и гель-фильтрация. Первая отличается простотой, но требует большей тщательности и аккуратности. Вторая отличается дороговизной фирменных колонок ([[http://www.prinsep.com/html/products/|Centricep Spin Columns]] - ~4$/шт по каталогу Princeton Separation Inc.; [[http://www1.amershambiosciences.com/aptrix/upp01077.nsf/Content/Products?OpenDocument&ModuleId=39964&hometitle=search| AutoSeq]] - ~2.82 Euro/шт по каталогу Amersham Pharmacia Biotech и [[http://www.sigmaaldrich.com/cgi-bin/hsrun/Distributed/HahtShop/HAHTpage/frmCatalogSearchPost?Brand=SIGMA&ProdNo=S5059|SigmaSpin Post reaction Clean Up Columns]] - ~2.5$/шт, по каталогу Sigma). newline \\ Нами успешно используются два протокола очистки реакций секвенирования ДНК от невключившихся BigDye-ddNTP: - гельфильтрация через приготовленные самостоятельно колонки с сорбентом Sephadex G-50 Superfine. - осаждение изопропанолом.