sequest:research:devices:small_genomes:dna_quality

Требования к качеству ДНК





1. ДНК должна быть растворена в деионизованной воде с концентрацией не менее 20 нг/мкл.

2. В образце ДНК должна быть измерена концентрация РНК на Qubit. В том случае, если концентрация РНК >20% от концентрации ДНК, препарат должен быть обработан РНКазой, очищен от последней, а измерения повторены.

3. Необходимо привести спектр поглощения (200-300 нм) образца ДНК. Спектр должен быть классическим с максимумом на 260 нм и минимумом на 230 нм. Соотношение A260/ A280 1.6-1.8, а A260/ A230 в пределах 2-2.2.

4. Общее количество ДНК, измеренной на Qubit, должно составлять не менее 500 нг и не должно отличаться более чем на 20% от количества определенного при A260 на спектрофотометре.

5. Необходимо привести электрофорез образца ДНК с нанесенным маркером, из которого будет видно, что длина фрагментов ДНК составляет не менее 10 Кб. Последнее особенно критично, если планируется сборка кольцевого бактериального генома с использованием MinIon.